Réamhrá Táirge
|
Ainm Táirge |
Cat. Níl. |
Spec. |
|
miRNA An Chéad Snáithe Trealamh Sintéise cDNA (Frithghníomh Fuíll) |
G3334-25 |
25 rxns |
Cur síos ar an Táirge/Réamhrá
miRNA Tá na himoibrithe go léir is gá do shintéis cDNA an chéad snáithe miRNA (Frithghníomh Fuíll). Úsáideann an trealamh RNA iomlán nó miRNA mar theimpléad, agus Polai(A) imoibriú fuíll Polymerase agus imoibriú trascríobh droim ar ais a synthesize a shintéisiú éagsúla miRNA chéad snáitheanna cDNAs le héifeachtacht ard. Soláthraíonn an trealamh freisin U6 Forward Primer agus Universal Reverse Primer le haghaidh aimplithe ina dhiaidh sin (infheidhme maidir le samplaí daonna, francach agus luch), agus ní gá an táirge cDNA sintéiseithe aon-shnáithe a dhearadh ach le primer PCR ar aghaidh le haghaidh PCR nó qPCR ina dhiaidh sin.
Coinníollacha Stórála agus Loingseoireachta
Long le oighear fliuch; Stóráil ag -20 céim , bailí ar feadh 12 mhí.
Ábhar Táirge
|
Uimhir na Comhpháirte |
Comhpháirt |
G3334-25 |
|
G3334-1 |
miRNA RT Einsím Mixa |
25 μL |
|
G3334-2 |
5 × Maolán Frithghníomh |
100 μL |
|
G3334-3 |
U6 Ar Aghaidh PCR Primer (10 μM) |
100 μL |
|
G3334-4 |
Príomhaire PCR Droim Uilíoch (10 μM) |
100 μL |
|
G3334-5 |
Uisce Gan Núicléas |
1 ml |
|
Lámhleabhar |
Cóip amháin |
|
a: le RNase Inhibitor agus Poly(A) Polymerase.
b:le primers trascríobh droim ar ais, dNTP Meascán, ATP agus Mg²+.
Prótacal / Nósanna Imeachta Measúnachta
1. Ullmhúchán córas imoibrithe molta (ullmhú córas imoibrithe molta ar oighear)
|
Comhpháirt |
Toirt |
|
5 × Maolán Frithghníomh |
4 μL |
|
miRNA RT Meascán Einsím |
1 μL |
|
Iomlán RNA/miRNAa |
x μL |
|
Uisce Gan Núicléas |
Cuir le 20 μL |
a: is é an RNA iomlán molta 2 ug (gan níos mó ná 5 ug), agus is é 200 ng an miRNA molta.
2. Measc go réidh agus lártheifneoir.
3. Déan poly(A) a pholaiméiriú agus trascríobh droim ar ais ag baint úsáide as na coinníollacha teirmeacha molta thíos:
|
Teocht |
Am |
|
37 céim |
60 nóim |
|
85 céim |
5 soic |
4. Moltar an tuaslagán imoibrithe cDNA a fhaightear le haghaidh caolú grádáin sula n-úsáidfear é mar theimpléad le haghaidh PCR cainníochtúil fluaraiseachta ina dhiaidh sin.
Nóta
1. Glacadh cúram chun éilliú RNase a sheachaint le linn na hoibríochta.
2. Is féidir na táirgí trascríobh droim ar ais a stóráil ag -20 céim ar feadh tréimhse ghearr. Má tá gá le stóráil fhadtéarmach, moltar é a stóráil ag -80 céim tar éis pacála agus timthriallta reo-leáite arís agus arís eile a sheachaint.
3. Tá primers iartheachtach uilíoch do PCR cainníochtúla sa trealamh, agus is iad na primers in aghaidh an tsrutha ná primers a bhaineann go sonrach le miRNA, atá deartha de réir an sprioc-miRNA, agus go ginearálta is iad na primers in aghaidh an tsrutha na seichimh miRNA sprice a athraíonn U go T.
Chun Úsáid Taighde Amháin!
Clibeanna Te: trealamh sintéise cdna an chéad snáithe mirna (imoibriú fuíll), an tSín mirna an chéad snáithe cdna trealamh sintéise (imoibriú fuíll) monaróirí, soláthraithe, monarcha
