Fearas Braite Mear-Mheicoplasma aonchéime (Modh Aimpliúcháin Isothermal)

Is féidir leis an trealamh ocht gcineál mycoplasma a bhrath go tapa i meán saothraithe cille trí theicníc aimplithe isiteirmeach agus athrú datha amhairc. Gan eastóscadh DNA, cuireadh forshnáthán cultúir cille 1 μL go díreach leis an réiteach imoibrithe agus imoibríodh 30 min ag 65 céim . D'athraigh dath an tsampla dearfach ó bhuí go dearg, agus níl gá le hionstraim PCR ná clúdach oscailte don leictreafóiréis don phróiseas iomlán, rud a d'fhéadfadh an tras-éilliú de bharr aerasóil a sheachaint go héifeachtach. I gcomparáid leis an modh PCR traidisiúnta, tá na buntáistí a bhaineann le hoibriú simplí, íogaireacht ard ag an táirge seo, agus féadann sé éagsúlacht coscóirí PCR a fhulaingt sa mheán cultúir, agus mar sin níl aon feiniméan diúltach bréagach ann, agus tá na torthaí braite an-chomhsheasmhach le qPCR.

Seolta le oighear fliuch agus stóráilte ag -20 céim ; bailí ar feadh suas le 12 mhí.

a: Tá oibreáin chromogenic ann.

Sula dtosaíonn tú (léigh go cúramach le do thoil)

Socraigh folctha uisce 65 céim nó bloc teasa miotail roimh ré.

1. Ullmhúchán samplach le tástáil:

a. Cealla greamaitheacha: Ionsúigh an comhleanúnach go díreach. Moltar na samplaí a ghlacadh nuair a bhíonn an ionaclú cille nó an t-athrú leachtach níos mó ná 3 lá agus go bhfuil an leibhéal cumar thart ar 90%. Ag an am seo, tá ábhar an mycoplasma san supernatant ard agus is féidir é a bhrath go héasca.

b. Cealla fionraí: Fuarthas an comhshnaidhm tar éis lártheifneoraithe ag 1,000 rpm ar feadh 5 nóiméad. Moltar na samplaí a ghlacadh tar éis ionaclú cille nó athrú sreabhach ar feadh níos mó ná 3 lá, nuair a bhíonn ábhar mycoplasma sa mheán cultúir cille ard agus is féidir é a bhrath go héasca.

2. Córas imoibrithe

a: Úsáidtear Mycored Maolán bun os cionn tar éis leá.

b: De réir líon na samplaí, tar éis an córas imoibrithe thuas a ullmhú, é a fho-phacáil isteach sa fheadán imoibrithe, cuir 20 μL de Paraffin Oil, agus ansin dul ar aghaidh go dtí an chéad chéim eile.

3. Cuir samplaí leis

a. Rialú diúltach: Níor cuireadh aon sampla leis an gcéad fheadán imoibrithe mar rialú diúltach.

b. Rialú dearfach: Cuireadh 1 μL Rialú Dearfach leis an bhfeadán imoibrithe deireanach mar rialú dearfach.

c. Sampla le tástáil: Cuir 1 μL comhshó saothrán cille leis an gcuid eile den fheadán imoibrithe.

a: Leathnaigh ceann na leideanna pípéad le do thoil faoi leibhéal leachtach ola pairifín chun samplaí a chur leis.

4. Coinníoll imoibrithe

Aistrigh an feadán imoibrithe chuig dabhach uisce réamhthéite 65 céim nó folctha miotail chun 30 nóiméad a ghoradh. Mura léir an fhorbairt datha is féidir an t-am imoibrithe a leathnú go 40 nóiméad.

Tóg amach an feadán imoibrithe díreach tar éis dheireadh an imoibrithe, agus má tá an réiteach imoibrithe fós buí tar éis é a chur ar ais go teocht an tseomra, beidh an toradh diúltach. Má casadh an tuaslagán imoibrithe dearg, tá an toradh dearfach. Níor cheart an feadán imoibrithe a oscailt, ar shlí eile beidh sé mar thoradh go héasca ar thruailliú aerasóil.

1. Ná oscail an feadán imoibrithe tar éis don imoibriú a bheith críochnaithe.

2. Moltar go n-úsáidfí na leideanna pípéad le eilimint scagaire le linn réiteach imoibrithe a ullmhú, agus ba cheart na leideanna pípéad scoite agus an fheadáin imoibrithe a chur isteach sa mhála féin-séalaithe agus déileáil leo in am.

3. Bain úsáid as scavenger aigéad núicléach (G3020 molta) chun an binse tástála agus an pípéad a ghlanadh go minic.

Chun Úsáid Taighde Amháin!

Clibeanna Te: trealamh braite mycoplasma tapa aon-chéim (modh aimplithe isiteirmeach), trealamh braite mycoplasma tapa aon-chéim tSín (modh aimplithe isiteirmeach) monaróirí, soláthraithe, monarcha