Trealamh Staining Dúbailte Calcein-AM/PI Maireachtáil / Cill Mharbh

 

Ainm Táirge	Cat. Níl.	Spec.
Trealamh Staining Dúbailte Calcein-AM/PI Maireachtáil / cealla marbha	G 1707-100T	100T

 

 

Tá Calcein AM bunaithe ar Calcein (Calcein acetoxymethyl ester) agus tugtar isteach grúpa eistear acetylmethoxymethyl (AM), a chumhdaíonn ní amháin an chuid mhóilíneach de Calcein a cheilíonn cailciam, ach freisin a fheabhsaíonn a hidreafóbacht, rud a ligeann do Calcein AM briseadh go héasca ar an scannán. cealla beo. Nuair a théann Calcein AM isteach sa chill, is féidir é a lomadh go Calcein trí eistearas ceallacha ingenacha. Le caillteanas an ghrúpa AM, ní féidir le Calcein dul tríd an membrane cille go héasca agus mar sin coinnítear é taobh istigh den chill; ina theannta sin tá an chuid mhóilíneach den chailciam chelated nochta go páirteach agus tá an taiscéalaí Calcein in ann fluaraiseacht láidir glas a astú nuair a bhíonn sé ceangailte le hiain chailciam intracellular. Tá easpa eistiráis i gcealla marbha, nach féidir le Calcein AM a hidrealú isteach i gCalcein, agus mar sin ní féidir é a lipéadú. Tá PI (iaidíd própidiam) in ann é féin a leabú sa DNA ceallach héilics dúbailte chun fluaraiseacht dearg a tháirgeadh, ach ní féidir leis na seicní cille maireachtála a stainiú go díreach. cealla, agus ní féidir leis cealla marbha a stainiú ach amháin nuair a cuireadh isteach ar na seicní cille. Dá bhrí sin, trí Calcein-AM a chomhcheangal le PI is féidir lipéadú a dhéanamh ar chealla beo agus marbha araon.

Tá an trealamh seo bunaithe ar na prionsabail thuas agus tá sé optamaithe agus dífhabhtaithe ag ár gcuideachta chun lipéadú stainse dúbailte a dhéanamh trí lipéadú Calcein-AM ar chealla beo agus lipéadú PI cealla marbha, rud a cheadaíonn anailís a dhéanamh ar leibhéil cille beo agus marbh araon.

 

 

Long le oighear fliuch; Déan stóráil ag -20 céim ar shiúl ó sholas, bailí 12 mhí.

 

 

Uimhir na Comhpháirte	Comhpháirt	G 1707-100T
G1707-1	réiteach Calcein-AM	20 μL
G1707-2	réiteach PI	20 μL
G1707-3	Maolán braite	10 ml
Lámhleabhar		Cóip amháin

Nóta: Is braite córais 100 μL amháin atá sna hamanna imoibrithe thuas.

 

 

1. Réiteach oibre Calcein AM/PI a ullmhú

a) Bain an tuaslagán Calcein-AM, tuaslagán PI agus maolán braite as an reoiteoir, ansin lig dóibh te go teocht an tseomra.

b) Déan an réiteach oibre a chumrú de réir an ghá, is féidir leis an gcóras cumraíochta tagairt a dhéanamh don tábla seo a leanas, tabhair faoi deara go bhfuil tréithe difriúla ag cealla éagsúla, is féidir an turgnamh a chur leis nó a laghdú de réir staid iarbhír an tiúchan probe a úsáidtear, an chuid is mó den cóimheas caolaithe cille idir 1:500-2000;

 

	10 sampla	50 sampla	100 sampla
réiteach Calcein-AM	2 μL	10 μL	20 μL
réiteach PI	2 μL	10 μL	20 μL
Maolán braite	1 ml	5 ml	10 ml

 

2. Marcóir staining cille:

a) De réir riachtanas turgnamhach, na cealla a chóireáil le drugaí nó spreagthaí eile;

b) Maidir le cealla greamaitheacha, bailigh an comhleanúnach ar dtús, díolaic na cealla greamaitheacha atá fágtha le trypsin agus measc na cealla go léir go maith. Maidir le cealla ar fionraí, bailigh na cealla go léir go díreach.

c) Déan na cealla bailithe a lártheifneoiriú ag 800-1,000 rpm ar feadh 3-5 nóim, bain an comhshamhail, agus nigh go críochnúil na cealla 2-3 uair le PBS nó maolán eile chun an gníomhaíocht esterase iarmharach;

d) Cuir tuaslagán oibre braite calcein AM/PI leis an millíní cille a fhaightear thuas agus athfhionnaigh na cealla go réidh agus go críochnúil. Molaimid réiteach oibre braite Calcein AM / PI chun na cealla a athbhunú chun dlús na cille a rialú ag 1 × 105 ~ 1 × 106 / mL.

e) Goradh ag 37ºC ar feadh 15-30 nóiméid sa dorchadas.

3. Breathnú staining cille:

a) De réir na gceanglas turgnamhacha, is féidir micreascóp fluaraiseachta, cítoiméadracht sreafa, léitheoir microplate agus ionstraimí eile a úsáid chun leibhéal na gcealla beo agus na gcealla marbh a urramú agus a anailísiú;

b) Is fluaraiseacha glasa iad na cealla beo atá lipéadaithe ag Calcein-AM, le EX/EM=494/517 nm; Is iad na cealla marbha lipéadaithe PI fluaraiseacht dearg, EX/EM=535/617 nm.

 

 

1. Mar gheall ar airíonna éagsúla cille-go-cill agus modhanna braite éagsúla, tá an tiúchan probe agus raon ama gor a thuairiscítear i gcéim le haghaidh tagartha amháin agus is féidir é a choigeartú de réir an staid shonrach.

2. Tá fadhbanna múchta ag gach ruaim, Bí ar shiúl ón solas agus tú ag láimhseáil ruaimeanna fluaraiseacha nó samplaí daite chun múchadh an fhluaraiseachta a mhoilliú.

3. Tá Calcein-AM an-íogair do thaise, le do thoil a ligean thar ceal go cuí de réir an tsocraithe turgnamhacha agus tú ag úsáid don chéad uair. Ba chóir réiteach oibre measúnachta Calcein AM/PI a dháileadh agus a úsáid anois.

4. Ar mhaithe le do shláinte agus sábháilteacht, caith spéaclaí sábháilteachta, lámhainní nó éadaí cosanta.

 

Chun Úsáid Taighde Amháin!

 

 

Clibeanna Te: trealamh staining dúbailte calcein-am/pi maireachtála / cille marbh, an tSín calcein-am/pi maireachtála / cealla marbha trealamh staining dúbailte monaróirí, soláthraithe, monarcha